Eksperimen Pembahagian Sel : Mitosis Dalam Akar Bawang Putih

by Nurul Aimi Zolkapley

Mitosis adalah salah satu tahap dalam kitaran sel di mana sel kromosom mereplikasi dan terpisah, akhirnya membentuk dua sel yang sama secara genetik. Tidak seperti meiosis, bilangan kromosom dikekalkan dalam kedua-dua sel anak.

Mitosis aktif pada spesies Allium dimana berlaku dua kali dalam tempoh 24 jam dengan fasa maksimum primer sekitar pukul 11 malam dan fasa maksimum sekunder sekitar pukul 1 tengah hari.

Fasa Mitosis

Oleh itu, berdasarkan maklumat ini, kedua-dua jangka masa ini adalah yang paling baik untuk mengumpulkan akar untuk membuat eksperimen mitosis.

Untuk menjalankan eksperimen ini, anda memerlukan:

• Bawang putih
• Bikar
• Pencungkil gigi
• Cecair Carnoy
• 70% etanol
• 1N asid hidroklorik 
• Slaid kaca
• Cover slips
• Pisau blade / pisau bedah
• Piring petri
• Noda Aceto-carmine / Aceto-orcein
• Botol kecil / bekas kecil
• Penunu Bunsen
• Kertas serap (Blotting paper)
• Pipet penitis
• Penyepit kecil (forcep) / gunting
• Mikroskop
• Minyak rendaman (Immersion oil)

Langkah-langkah:

1. Tusuk bawang menggunakan pencungkil gigi dan letakkan di atas bikar yang berisi air paip. Pastikan pangkal bawang menyentuh permukaan air.
   
   
2. Biarkan selama beberapa hari dan akar akan tumbuh.
   
   
3. Setelah akar tumbuh kira-kira 2-3cm, potong 1cm pada hujung akar.
   
4. Masukkan ke dalam botol kecil yang mengandungi cecair Carnoy. Biarkan akar direndam dengan cecair Carnoy selama 48jam. (Cecair Carnoy digunakan untuk memperbaiki sel DNA hujung akar)
   
   (Sekiranya anda merancang untuk menyimpan akar dengan lebih lama untuk kegunaan yang akan datang, pindahkan akar ke dalam botol yang mengandungi 70% etanol. Etanol akan mengeringkan tisu akar dan memelihara DNA. akar yang diawetkan dalam etanol mesti disejukkan dan disimpan dengan baik dalam peti ais, ia boleh digunakan selama beberapa tahun untuk kajian genetik).
5. Ambil beberapa akar dari cecair Carnoy atau etanol dan pindahkan ke piring petri yang mengandungi 1N asid hidroklorik. (Asid akan melembutkan dinding sel dan melemahkan sambungan sel sehingga mudah untuk memotong akarnya)
   
6. Panaskan piring petri selama 5 saat.
   
7. Biarkan selama 2 minit.
8. Cuci akar di dalam air suling beberapa kali.
   
9. Pindahkan akar ke atas piring petri yang mengandung noda Aceto-carmine / Aceto-orcein. Ini adalah noda kromosom yang memberikan warna merah pekat pada bahan nuklear pada sel-sel akar.
   
10. Panaskan cecair noda pada api selama 5 saat dan biarkan akar dalam cecair noda selama 5-10 minit.
    
11. Pindahkan hujung akar ke slaid kaca bersih yang berisi setitis air.
    
12. Dengan menggunakan pisau blade atau pisau bedah, potong kira-kira 1mm hujung akar dan buang sisanya. Bahagian hujung akarnya adalah bahagian pembelahan sel aktif dan diperlukan untuk eksperimen mitotik.
    
13. Letakkan cover slips dengan perlahan di atas hujung akar dan pastikan tiada gelembung udara.
    
14. Dengan menggunakan hujung forsep atau pensil yang tumpul, ketuk perlahan-lahan atas cover slips sehingga akar dihimpit secara seragam di antara slaid kaca dan cover slips.
    
15. Akar yang dihimpit oleh slaid kaca dan cover slips dengan betul akan kelihatan merah jambu yang kabur hingga seperti tidak berwarna.
    
16. Slaid kaca tersedia untuk membuat pemerhatian mikroskopik.
    
17. Anda akan melihat akar halus di bawah 10x mikroskop. Seperti yang anda lihat, sel ujung akar tersebar dengan baik dan hampir tidak bertindih. Sekiranya akar tidak cukup himpit, anda boleh mengulangi langkah 15 sehingga anda dapat menyebarkan sel akar dengan baik.
18. Imbas slaid sel yang menunjukkan tahap pembahagian mitotik di bawah daya rendah dan kemudian teruskan pemerhatian di bawah daya tinggi, seperti 40x atau 100x di bawah  lensa rendaman minyak.
    
19. Untuk pemerhatian di bawah 100x, anda perlu menambahkan setitik minyak rendaman di atas cover slips dan perlahan-lahan turunkan lensa sehingga menyentuh permukaan minyak. Kemudian, laraskan tombol penyesuaian halus untuk memberi tumpuan.
    
20. Anda boleh mengambil mikrofotografi dari pelbagai peringkat pembahagian sel dengan menggunakan teknik mudah menggunakan telefon bimbit dan tripod, seperti itu.